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Come fare un buffer di trasferimento Bis - Tris
L'accoppiamento di bis - tris è importante in biochimica grazie alla sua capacità di agire come un zwitterion , possedendo uno ione positivo e negativo sulla molecola . Può servire come un buffer nella regione di pH 7,6 . Si è aggiunto gel utilizzati in elettroforesi per aiutare a mantenere le molecole in soluzione e favorisce la separazione delle molecole . Buffer di trasferimento rimuovono le molecole da lastre di gel di analisi di elettroforesi e di trasferirli membrane per blotting occidentale. Ogni produttore di rapporti attrezzature elettroforesi leggermente diverse ricette per fare un buffer di trasferimento , ma il seguente è per il buffer di trasferimento utilizzato con i sistemi NuPAGE su samples.Things non ridotti che vi serve
Bicine
Bis -tris
EDTA
250 bicchiere ml
Metanolo
flacone 1000 ml di acqua ultrapura


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1

Prepara gli ingredienti per il buffer pesando gli importi di ogni componente su una bilancia analitica . I tre componenti a secco per un buffer di trasferimento è bicine , bis- tris e EDTA . Peso out 4.08 bicine gm , 5,23 g di bis- tris e 0,29 g di EDTA su fogli individuali di pesatura .
2

Aggiungere questi componenti per un bicchiere da 250 ml . Sciogliere questi componenti con 100 ml di metanolo . Mescolare fino a quando i solidi si sciolgono .
3

Trasferire i componenti disciolti in un flacone da 100 ml e lavare bicchiere con acqua ultrapura per assicurare il trasferimento di tutti i componenti .
4

Riempire il resto del volume di 1 litro con acqua ultrapura . Aggiungere l'acqua in porzioni che permettono miscelazione sufficiente tra ogni aggiunta . Mescolare bene il contenuto per ottenere una concentrazione uniforme .