Coltivazione colture pure di batteri è una tecnica importante per i biologi molecolari e microbiologi da padroneggiare . I microbiologi hanno bisogno di isolare ceppi specifici di batteri per caratterizzare e studiare loro, mentre i biologi molecolari spesso utilizzano batteri E. coli in coltura per produrre proteine ​​desiderate o per effettuare copie di un gene . Quando si lavora con colture batteriche in una classe di laboratorio o altro ambiente di laboratorio , la cosa più importante da capire è che tu e tutto il manico è potenzialmente contaminati con altre specie di batteri . Per evitare di introdurre queste altre specie nella vostra cultura , è necessario praticare una tecnica sterile a tutti i times.Things che ti serviranno
guanti e protezioni per gli occhi
brodo di coltura di batteri che si desidera cultura
preparati piastra di agar nutritivo ( capsula di Petri )
becco Bunsen e accendino a pietrina
piatto di vetro contenente il 95 per cento di etanolo
ciclo inoculazione
Parafilm
Incubatore impostato a 37 gradi C
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Indossare i guanti e occhiali protettivi .
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Prendere il brodo di coltura dei batteri che si desidera coltivare al banco del laboratorio , insieme ad una piastra di Petri preparato contenente agar nutriente . Assicurarsi che il brodo di coltura rimane sempre coperto .
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Collegare il becco Bunsen per l'uscita del gas al vostro banco di laboratorio. Accendere il gas e la luce con attenzione la fiamma . Assicurarsi che materiali infiammabili nelle vicinanze, soprattutto il piatto di vetro contenente l'etanolo . Tenere il piatto di vetro coperto per garantire che i vapori infiammabili non si accumulano .
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Immergere la punta del ciclo inoculazione in etanolo , quindi tenere nel becco Bunsen fino a quando il metallo diventa incandescente. State molto attenti a non toccare il metallo se stessi in modo da non avere bruciato . Assicurati di ri- coprire il piatto con l'etanolo in esso immediatamente.
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Togliere il coperchio dal provetta contenente il brodo di coltura batterica. Posizionare la punta del tubo nella fiamma solo per un secondo circa per uccidere tutti i batteri sulla punta del tubo . Non posizionare il tubo intero nella fiamma , appena la punta , e non permettono di rimanere nella fiamma per troppo tempo .
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Tenere la punta del ciclo inoculazione vicino al tubo contenente il brodo , poi tenerla all'interno del tubo per quindici secondi o giù di lì , ma senza toccare il brodo - . metallo caldo uccidere i vostri batteri
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Immergere la punta del loop nel brodo per un secondo.
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Rimuovere la punta del ciclo e tenerlo in aria . Nel frattempo , il bastone la punta del tubo nella fiamma per un secondo ancora , poi richiudere esso .
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Tenere il coperchio della piastra appena fuori il piatto stesso. Delicatamente realizzato il ciclo inoculazione avanti e indietro attraverso l'agar a zig - zag .
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Riposizionare il coperchio del piatto e sterilizzare l' ansa da inoculo di nuovo come avete fatto prima .

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Spegnere il becco Bunsen .
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girare la piastra ed il coperchio capovolto in modo che il lato agar è in cima . Utilizzare il Parafilm per sigillare la giunzione tra piastra e coperchio , andando tutto intorno e stretching ogni pezzo di pellicola in modo che la linea di giunzione è completamente coperto . Parafilm è un genere di film plastico spesso usato nei laboratori per sigillare provette e altri contenitori .
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Trasferire la piastra per l'incubatore e conservare lì per 48 ore o giù di lì . L'incubatore dovrebbe essere fissata a temperatura fisiologica , che è a 37 gradi Celsius.