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Come ridurre il legame non specifico di contenitori
In un immunoenzimatico la capacità di legame in un contenitore o in pozzetti è superiore alla quantità di proteina posto nel contenitore o pozzi . Per ridurre o prevenire anticorpi o altri tipi di proteine ​​e molecole di assorbire al contenitore o pozzi , il dosaggio deve essere lavata con il tampone appropriato e uno specifico reagente bloccante deve essere aggiunto . Il tipo di buffer e del reagente di blocco scelta dipende dal tipo di assay.Things sperimentali che vi serve
pozzetti della piastra
soluzione tampone
Blocco reagente
Pipetta
Antigen
Anticorpo

Mostra MoreInstructions
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Coat pozzetti della piastra con l'antigene . Utilizzare una diluizione di antigene . Pure soluzioni di antigene non sono necessari poiché solo il 3 per cento della proteina nel campione è la proteina bersaglio . In caso di diluizione garantire che i campioni contengono l'antigene ad una concentrazione che è nel campo di rilevazione dell'anticorpo . Pipettare la soluzione di diluizione di antigene le pozzetti della piastra . Alcune piastre possono essere pre- rivestiti con l'antigene . Leggere le istruzioni fornite con i pozzetti della piastra .
2

Coprire le piastre con un materiale plastico adesivo e incubare una notte . Lavare le piastre con soluzioni tampone , come soluzione salina tamponata con Tris o soluzione salina tamponata con fosfato . Per lavare , sciacquare le piastre utilizzando una spruzzetta riempito con la soluzione tampone sopra un lavandino laboratorio . Accarezza le piastre con un tovagliolo di carta per rimuovere ogni residuo gocce di soluzione tampone .
3

Ridurre il legame non specifico di proteine ​​e molecole utilizzando un buffer di blocco o di reagente , come un detersivo bloccante , latte in polvere o siero bovino . Il tipo di blocco reattivo utilizzato dipenderà dal dosaggio . Aggiungere il reagente bloccante ai pozzetti utilizzando una pipetta . Coprire la piastra di nuovo con la plastica adesivo e incubare una notte .
4

Re- lavare i pozzetti della piastra di nuovo con una soluzione tampone . Questi passaggi diminuire la quantità di legame non specifico che può verificarsi nei pozzetti della piastra prima di aggiungere la soluzione di anticorpi necessaria per la procedura . Inoltre , i reagenti bloccanti possono aiutare a ridurre colori di sfondo nei risultati dei test .