La reazione a catena della polimerasi , o PCR , è una tecnica utilizzata per effettuare copie di DNA . In particolare , PCR utilizza un enzima noto come una polimerasi , che aggiunge singole basi del DNA di una catena crescente di DNA . La reazione di PCR dipende dai primer , brevi filamenti di DNA polimerasi ha bisogno per iniziare la riproduzione del DNA , e la matrice di fondo , una miscela di reagenti e primer stessi . Ogni reazione di PCR dovrebbe essere un volume totale di non più di 50 uL.Things Hai bisogno
10x PCR Buffer
2mM dNTP
primer 50pmol
25mM MgCl2
1 dima pmol di DNA
acqua depurata
provette Eppendorf

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Aggiungere 2.5 ul di buffer di PCR in una provetta Eppendorf , così come 2.5 uL dei dNTP .

2

Aggiungi 2 uL ( 50 pmol ) dei primer alla provetta Eppendorf e 1 ul di MgCl2 .
3

Aggiungere acqua fino a raggiungere un volume finale di 50 uL . Aggiungere 1 pmol di DNA stampo , o 1 uL di soluzione di DNA , a seconda di quale è più facile da misurare . La vostra matrice di fondo è preparato .
4

Ripetere i passaggi da 1 a 3 per il maggior numero di matrici come si desidera preparare .