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Come dire se un Aptamer ha trovato la sua Target
Aptamers sono relativamente brevi catene di nucleotidi creato per legarsi a un target specifico . I nucleotidi sono gli stessi componenti che compongono le molecole di DNA o RNA , e quando sono messi nella giusta configurazione che sono altamente specifici e hanno alta affinità per i loro obiettivi . L'alta specificità significa che il aptamer lega solo al bersaglio è progettato per ed alta affinità significa che il aptamer si lega molto facilmente al suo obiettivo .
Ma questi sono solo piccole molecole , e non si può semplicemente dare un'occhiata e vedere che essi abbinati con i loro obiettivi . Per fortuna , ci sono modi per ottenere che aptamer a riferire . Ci sono due diverse configurazioni generali , quello in cui il aptamer lega il suo obiettivo internamente o in un solo sito di legame esterno , e l'altro in cui l'obiettivo si lega a due sites.Things che ti serviranno
Aptamer apparecchiature sintesi
elettrodi d'oro e nanoparticelle
molecole target in opportune soluzioni tampone
amperometro
mostrare Altre istruzioni
unico sito Legatura
1

Collegare un complesso ferrocene ad una estremità di il aptamer . Ferrocene è un composto organometallico che ha buone proprietà di elettroni di trasferimento .
2

Costruire la aptamero con un gruppo tiolo per terminare l'altra estremità . Il gruppo tiolo è un accordo zolfo - idrogeno ha una forte affinità per l'oro .
3

Costruire un elettrodo d'oro , e permettere ai aptameri di allegare alla superficie .

4

Immergere l'elettrodo nella soluzione di interesse , e monitorare la corrente . Quando l' aptamero lega il bersaglio, cambierà la sua configurazione e portare le sue due estremità vicini tra loro . Questo porta il ferrocene vicino al elettrodo d'oro , che aumenta la corrente , in modo da monitorare la corrente può dire quanti dei aptameri hanno trovato i loro obiettivi .
Doppia sito Legatura
5 cambiamento di colore è un metodo di verifica vincolante aptamer .

Immobilizzare un'estremità di un aptamero per una superficie fissa .
6

Introdurre la molecola bersaglio nella soluzione circostante aptameri sul piano fisso .
7

costruire un altro aptamer specifico alla stessa molecola bersaglio , e allegare una nanoparticella d'oro per l'altra estremità .
8

Lavare la soluzione , poi introdurre una soluzione di crescita di nanoparticelle . La soluzione crescita depositare oro aggiuntivi sui semi di nanoparticelle e creare un cambiamento di colore visibile in cui la molecola bersaglio è presente. Si può solo guardare la superficie e vedere la differenza di colore dove il aptamer ha trovato il suo bersaglio .