Apicoplasts sono un tipo di organello intracellulare presente in parassiti unicellulari che causano gravi malattie come la malaria , la toxoplasmosi e la coccidiosi . Organelli sono strutture complesse all'interno di una cella che non possono crescere e riprodursi da soli . Essi sono sorti quando un antenato dei parassiti inghiottito un altro organismo , che era probabilmente legato al alghe rosse . Poiché apicoplasts non sono cellule indipendenti , non possono essere coltivate in una cultura da soli . Per farle crescere bisogna far crescere i parassiti . Quello che segue sono le istruzioni alla cultura la fase di globuli rossi del Plasmodium falciparum , che provoca malaria.Things Avrai bisogno
Parasite magazzino
RPMI 1640 terreno di coltura
cappa a flusso laminare
Autoclave
Albumax II siero sostituto
D -glucosio
Hypoxantine
HEPES
Gentamicina solfato
boccette Cultura
incubatore cellulare
globuli rossi

Mostra Altre istruzioni
coltura Plasmodium falciparum
1

l'incubatore di cellule a 37 gradi Celsius e regolare la composizione del gas a 1 per cento di ossigeno , 3 per cento di anidride carbonica , e il 96 per cento di azoto.
2

Autoclave tutte le apparecchiature ei materiali non sterili
3

Lavorare in cappa a flusso laminare per mantenere la sterilità , preparare il mezzo finale aggiungendo quanto segue al mezzo di coltura RPMI 1640 :

D - glucosio ad una concentrazione finale di 20 mM .

Hypoxantine ad una concentrazione finale di 0,2 mM .

HEPES ad una concentrazione finale di 25 mM .

Gentamicina solfato ad una concentrazione finale di 25 mg /L.

Albumax II ad una concentrazione finale di 0,5 per cento w /v
4

Distribuire la quantità totale di mezzo made ​​in il passo precedente in tanti cultura palloni come desiderava e metterli sul agitatore nell'incubatrice.
5

Una volta che il mezzo ha raggiunto 37 gradi Celsius , aggiungere il parassita magazzino .
6

Modificare il terreno di coltura ogni giorno per mantenere i parassiti ben nutriti e vivi .
7

Aggiungi globuli rossi ogni altro giorno . Essi saranno infettate dai nuovi parassiti che vengono generati nella cultura . Se diventano troppi per un pallone , suddividere il contenuto in due o più supplementari quelli .